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MES的全稱是2-嗎啉乙磺酸,是一種人工合成的兩性離子緩沖劑。它在1966年由諾曼·古德(Norman Good)團(tuán)隊(duì)開發(fā),屬于著名的“Good's緩沖劑”家族,是生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用且重要的pH緩沖劑之一。
作為“Good's緩沖劑”家族的一員,MES擁有一系列優(yōu)越特性:
① 理想的pKa值:MES的pKa值在25°C時(shí)為6.15。根據(jù)緩沖理論,緩沖液在其pKa值±1的范圍內(nèi)最有效。因此,MES的理想緩沖范圍是pH 5.5 - 6.7。這個(gè)范圍恰好覆蓋了許多生物化學(xué)反應(yīng)的關(guān)鍵pH。
② 生物相容性好:對(duì)酶活性、細(xì)胞代謝干擾小;細(xì)胞毒性小,常用于細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白質(zhì)研究。
③ 化學(xué)惰性:不參與或干擾大多數(shù)生化反應(yīng);不會(huì)與必需的二價(jià)陽(yáng)離子(如Mg2?、Ca2?)強(qiáng)烈結(jié)合,而這對(duì)于許多酶(如ATP相關(guān)酶)的活性至關(guān)重要。
④ 高水溶性:在水中溶解度很高,可以方便地配制高濃度儲(chǔ)備液(如1M)。
⑤ 低紫外吸收:在波長(zhǎng)大于260nm時(shí)吸光度很低,不會(huì)干擾核酸或蛋白質(zhì)的紫外分光光度法檢測(cè)。
⑥ 熱穩(wěn)定性好:在高溫下相對(duì)穩(wěn)定。
鑒于MES優(yōu)越的理化性質(zhì),與其他常用緩沖液成分相比具有以下顯著優(yōu)勢(shì)。
MES vs. PBS(磷酸鹽緩沖液) PBS在pH 7.0-7.4范圍緩沖能力強(qiáng),但會(huì)與鈣、鎂離子結(jié)合,并可能抑制某些酶活性。MES則沒有這些問題,且可以在更酸的pH下工作。
MES vs. Tris Tris的pKa為8.07,是堿性pH范圍的經(jīng)典緩沖劑。而MES是酸性至中性范圍的補(bǔ)充。Tris對(duì)溫度敏感,且可能在某些反應(yīng)中作為活性基團(tuán)參與。
MES vs. HEPES HEPES的pKa為7.55,是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的中性緩沖劑之一。MES則可以在更酸的pH范圍內(nèi)作為HEPES的補(bǔ)充。
綜合上述優(yōu)勢(shì)特點(diǎn),MES在生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用:
- 蛋白質(zhì)電泳與純化:SDS-PAGE(蛋白凝膠電泳)/層析色譜。
- 細(xì)胞生物學(xué):用于配制培養(yǎng)基或灌流液,維持細(xì)胞外環(huán)境的pH穩(wěn)定。
- 細(xì)胞器分離:在亞細(xì)胞組分分離的勻漿和離心介質(zhì)中提供緩沖環(huán)境。
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生物化學(xué)與酶學(xué):為酶活性測(cè)定、酶動(dòng)力學(xué)研究提供穩(wěn)定的pH環(huán)境。
- 分子生物學(xué):Northern Blot(RNA印跡)/某些核酸雜交和檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中作為緩沖成分。
綜上所述,MES是一款性能卓越、應(yīng)用廣泛的緩沖劑。其核心價(jià)值在于能夠提供一個(gè)pH值為5.5 - 6.7的弱酸性生理范圍的穩(wěn)定、惰性且廣泛兼容的化學(xué)環(huán)境,以確保生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)的順利開展。
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貨號(hào) |
中文名稱 |
英文名稱 |
CAS |
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A0689 |
2-嗎啉乙磺酸 |
MES anhydrous BioChemica |
4432-31-9 |
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